A hidroxiprolina é um aminoácido presente no colágeno, encontrada no tecido conjuntivo, principalmente na matriz óssea. Na decomposição dessa proteína formam-se peptídeos que contêm hidroxiprolina, que em grande parte, não sofrem hidrólise e são eliminados na urina.
Observa-se uma redução na formação da hidroxiprolina em pacientes com deficiência de vitamina C.
A avaliação dos níveis de hidroxiprolina urinária pode ser considerada como marcador bioquímico de lesão músculo-esquelética, pois, o aumento dos seus níveis na urina indica catabolismo de colágeno do aparelho locomotor. Níveis elevados também podem indicar reabsorção e destruição óssea; Doença de Paget e hiperparatireoidismo.